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    一文讀懂酶聯(lián)免疫吸附實驗的概念及原理
    
            
    
              發(fā)布日期：
              2022-01-17
            
    
            
    
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             　　酶聯(lián)免疫吸附實驗是酶免疫測定技術中應用*的技術。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯微量反應板)表面，使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。該技術可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優(yōu)點。
    　　
    　　一、基本概念
    　　1、免疫：籠統(tǒng)地概括起來，免疫就是人和動物機體防御、排除外來物質(異物)進人體內，同時識別和清除體內死亡、變性物質和平定體內叛亂分子突變細胞，以保護和穩(wěn)定自身的防護機制。
    　　2、抗原：抗原是指那些能夠誘導機體的免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應答，產(chǎn)生抗體和致敏效應淋巴細胞，并在體內外與之特異性結合，發(fā)生免疫反應的物質。
    　　3、抗體：是能與相應的抗原專一性結合的蛋白質分子，和機體其他生物大分子一樣是細胞的產(chǎn)物，分泌到體液中或表現(xiàn)在細胞表面上。
    　　4、抗原、抗體反應：抗原和抗體在體外的反應亦稱血清學反應。這類反應可借助免疫學方法進行檢測。
    　　
    　　二、酶聯(lián)免疫吸附實驗基本原理：
    　?、倏乖蚩贵w能吸附到固相載體表面，并保持其免疫學活性；
    　　②抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性；
    　　③酶標抗體與相應抗原或抗體結合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例。
    　　以雞敗血支原體（Mg）抗體檢測為例：試驗用Mg抗原包被96孔板。被檢樣品加入包被孔后的孵育階段，血清樣品中的特異性Mg抗體與包被的抗原反應形成復合物，經(jīng)過洗滌，為結合的物質被洗掉，微孔加入酶標抗體，酶標抗體可以與吸附在包被孔內的雞抗體結合。反應后進行洗滌，為結合的酶標抗體被洗去。加入酶底物后的顏色反應與血清中的Mg抗體的數(shù)量直接相關。