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    免疫組化服務(wù)的操作步驟介紹

    發(fā)布日期: 2022-11-15
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       近年來,隨著免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn),使許多疑難得到了明確診斷。在常規(guī)病理診斷中,5%-10%的病例單靠H.E.染色難以作出明確的形態(tài)學(xué)診斷。尤其是免疫組化在診斷和鑒別診斷中的實(shí)用價(jià)值受到了普遍的認(rèn)可,其在低分化或未分化的鑒別診斷時(shí),準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。
     
      免疫組化操作步驟
     
     ?、?、石蠟切片脫蠟至水。
     
     ?、啤?%H2O2室溫孵育5-10分鐘,以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。
     
     ?、?、蒸餾水沖洗,PBS浸泡5分鐘x2(如需抗原修復(fù),可在此步后進(jìn)行)。
     
     ?、?、5-10%正常山羊血清(PBS稀釋)封閉,室溫孵育10分鐘,傾去血清,勿洗。滴加一抗工作液,37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過夜。
     
      ⑸、PBS沖洗,5分鐘x3次。
     
      ⑹、滴加適量生物素標(biāo)記二抗工作液,37℃孵育10-30分鐘。
     
     ?、?、PBS沖洗,5分鐘x3次。
     
      ⑻、滴加適量的辣根酶或堿性磷酸酶標(biāo)記的鏈霉卵白素工作液,37℃孵育10-30分鐘。
     
     ?、?、PBS沖洗,5分鐘x3次。
     
      ⑽、顯色劑顯色3-15分鐘(DAB或NBT/BCIP)
     
      ⑾、自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明,封片。
     
      從免疫組化結(jié)果而言,免疫組化技術(shù)服務(wù)主要涉及抗體免疫組化結(jié)果的描述與分析,圖片的確定與選取,相關(guān)數(shù)據(jù)的提供,上述工作是免疫組化工作的重點(diǎn)內(nèi)容,只有嚴(yán)格的免疫組化設(shè)計(jì),標(biāo)準(zhǔn)的免疫組化操作,專業(yè)化的結(jié)果分析才能更好的滿足客戶的要求,這點(diǎn)對(duì)于形式為腹水,上清,培養(yǎng)液之類的抗體顯得更為重要。